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肺炎支原體檢測時,為什么未致敏粒子孔陽性了?

時間:2019-03-05       作者:檢驗視界網      瀏覽量:4145 次

作者:雨果,西安交通大學第二附屬醫院檢驗科


周末值班,學生先看的肺炎支原體抗體的檢測結果,看完疑惑了,問我為什么3號標本的未致敏粒子孔竟然呈陽性反應?未致敏粒子不應該是陰性的不凝集狀態么?原圖截圖后如下

 

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發現問題、解決問題,在解決問題的過程中去體會臨床檢驗工作。那么究竟什么原因呢?又該如何解決呢?


話要從方法說起。


采用賽樂迪亞-MICROⅡ試劑盒應用在很多臨床實驗室,用以半定量檢測肺炎支原體,輔助診斷肺炎支原體感染。


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賽樂迪亞試劑的檢測原理是凝集法,用肺炎支原體(Mac株)細胞膜成分致敏人工明膠粒子,致敏粒子與人血清中存在的肺炎支原體抗體發生凝集反應。


其操作,用過的人其實都很熟悉,圖譜也比文字更加直觀。

 

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在結果判定時,一些原則卻是經常被人忽略的。


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判讀結果的前提是:

(1)和樣本同步進行的試劑對照,無論是致敏粒子還是未致敏粒子均是陰性(-);

(2)和樣本同步進行的陽性對照是1:320陽性;

(3)每個樣本的未致敏粒子孔均是陰性;


在這三個前提下,確定了血清稀釋液、致敏粒子、未致敏粒子都是有效的;


然后看樣本孔,并做出判斷:

(1)樣本未致敏粒子孔陰性(-),第3孔致敏粒子孔1:40陰性(-),樣本肺炎支原體抗體為陰性;

(2)樣本未致敏粒子孔陰性(-),第3孔致敏粒子孔1:40陽性(+),樣本肺炎支原體抗體為陽性,并報告(+)時的最終稀釋倍數作為抗體滴度。

這樣的判定很常見,不常見的是另一種,也就是在文章一開始提到的那一種,那就是當未致敏粒子孔為陽性或者弱陽性的時候又該怎么辦呢?

(3)由于非特異性抗體干擾,樣本未致敏粒子孔陽性(+)或弱陽性(±)時,第3孔致敏粒子孔1:40陰性(-),則樣本肺炎支原體抗體仍為陰性

(4)由于非特異性抗體干擾,樣本未致敏粒子孔和致敏粒子孔均呈陽性(+)或弱陽性(±)時,應對樣本進行吸收試驗


于是乎,我們對這一樣本進行了吸收實驗,也讓同學們借此明確了吸收實驗是怎樣一回事。


吸收試驗的重點在吸收二字;首先是血清和未致敏粒子按照1:9比例混勻,并在室溫下孵育30分鐘,然后離心取出上清液50微升加入第二孔,第三空之后每孔加入25微升血清稀釋液;從第二孔中吸出25微升到第三空依次如前所述進行對倍稀釋,最后加入未致敏粒子和致敏粒子,室溫靜置3小時觀察結果即可。


最終3號樣本經過吸收實驗后,證實結果為陰性。可能由于一些非特異性抗體的存在而造成未致敏粒子孔和致敏粒子空均呈現出陽性或者弱陽性結果。


小問題背后往往都是大故事,檢驗專業內容龐雜、涉及面廣,不放過任何一個環節,就總是收獲滿滿的。


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